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Principe
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ce schéma correspond
à un microscope dont le tube oculaire est
incliné (certains des microscopes du lycée) et
non à celui dont vous avez le dessin
ci-dessus)
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trajet des rayons lumineux
(à dessiner à partir des noms suivants:
objectif, oculaire, source lumineuse, lentilles, condenseur,
diaphragme)
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image virtuelle et image réelle:
l'image réelle est celle qui est dans votre œil
au niveau de votre rétine, l'image virtuelle est une
image construite par les lentilles qui est agrandie et
située à environ 25 cm derrière
l'extrémité de l'oculaire et dans l'axe de
celui-ci.
(La dessiner sur le même schéma à
côté)
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grossissement: (recopie ici sa
définition)
Le grossissement d'un objet est
le produit du grossissement de l'objectif par celui de
l'oculaire: on note par exemple:
G=10x60 ou (x600)
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résolution et distance de travail
La résolution est la plus petite distance
séparant deux objets que l'on peut distinguer
à l'aide du microscope: elle dépend de la
qualité des lentilles et de la nature même de
la lumière: elle est au maximum de 0,2 µm. On
peut l'augmenter en plaçant une goutte d'huile
à immersion (huile incolore dans laquelle la
lumière se propage à la même vitesse que
dans le verre) sur la préparation: on réalise
alors une observation "à l'immersion", l'huile
remplaçant l'air entre l'objet et l'objectif.
La distance de travail est la distance entre
l'objectif et l'objet: elle doit être d'autant plus
petite que le grossissement recherché est fort.
(à indiquer sur le schéma à
côté)
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les rayons lumineux chauffent la
préparation légèrement (on peut
utiliser une platine réfrigérée)
mais ne sont pas destructeurs: on peut donc observer
de petits êtres vivants entiers
(bactéries, unicellulaires) ou des fragments
vivants de plus grands organismes (pluricellulaires).
Par contre la plupart des objets biologiques ne sont pas
colorés ou sont faiblement colorés.
D'où la nécessité de colorer la
plupart des échantillons.
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Utilisation
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réaliser une préparation:
lame (porte-objet), objet, une goutte d'eau ou
d'huile ... (mais jamais d'air), lamelle (couvre-objet).
Pour les conserver et empêcher l'évaporation de
l'eau contenue entre la lame et la lamelle on recouvre le
bord de la lamelle (lutage) avec de la paraffine, une
résine ou du vernis à ongles.
(A réaliser: des grains de pollen, des cellules
végétales chlorophylliennes, des
unicellulaires à noyau, des bactéries)
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CONSEILS
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on fait très attention à ne pas mettre
trop d'eau sur la préparation et à ne pas
mouiller la platine et l'objectif
on regarde d'abord à l'œil nu avant de
mettre une préparation sous le microscope, on
apprécie ainsi la taille de l'objet, sa couleur, son
mouvement éventuel....
on utilise un chiffon doux pour essuyer
l'oculaire, l'objectif et les éventuels
débordements de la préparation
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mise au point:
On commence par l'objectif le plus faible. On place
d'abord l'objectif au plus près de la
préparation (distance de travail la plus faible
possible) puis on met son œil à l'oculaire (on
regarde au microscope) et l'on met au point en augmentant
la distance de travail progressivement à l'aide
de la vis macrométrique puis de la vis
micrométrique. Si le microscope est de bonne
qualité, il est compensé et une fois la
mise au point faite, elle reste valable pour tous les
objectifs. Avec le matériel dont vous disposez, vous
devrez faire quelques ajustements, normalement avec la seule
vis micrométrique.
(exercice chronométré et noté:
réussir à mettre au point sur des
spermatozoïdes humains)
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coloration:
(Vous devez réaliser deux colorations:
- coloration vitale non sélective: le rouge
neutre
- coloration vitale et sélective: coloration des
grains d'amidon de la pomme de terre avec de l'eau
iodée
- coloration létale et spécifique:
coloration de Gram pour les bactéries: ne
pourra être réalisée faute de
matériel.)
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immersion:
Vous n'avez qu'un seul objectif à immersion: c'est le
plus fort. Pour l'observation à l'immersion,
déposez une goutte d'huile au centre de la
préparation (sur la lamelle ! sans enlever celle-ci
!) puis réalisez l'ensemble des étapes de mise
au point en commençant par l'objectif le plus petit.
L'objectif ne trempera dans la goutte d'huile que pour le
grossissement le plus fort.
(à réaliser: une observation à
l'immersion des préparations colorées des
unicellulaires et des bactéries)
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retour
remarque:
certains des microscopes sont plus modernes et ont une
surplatine, un tube oculaire fixe et une source lumineuse
électrique...mais le principe est identique pour tous
les microcopes